隨著技術(shù)的進(jìn)步和應(yīng)用場(chǎng)景的要求，目前的醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)設(shè)備正朝著兩極化發(fā)展。用于中心實(shí)驗(yàn)室的設(shè)備通常具有結(jié)果準(zhǔn)，通量大，自動(dòng)化程度高的優(yōu)點(diǎn)，但是體積龐大、體系復(fù)雜、周轉(zhuǎn)時(shí)間長(zhǎng)。而用于臨床科室的檢驗(yàn)設(shè)備具備體積小、使用簡(jiǎn)單方便、可快速輸出結(jié)果的優(yōu)點(diǎn)，但是結(jié)果的準(zhǔn)確性相對(duì)較差，難以滿足診療需求。臨床診療服務(wù)機(jī)構(gòu)迫切需要一款產(chǎn)品，在保留體積小、使用方便、快速輸出結(jié)果優(yōu)點(diǎn)的同時(shí)，具備大型設(shè)備相同的準(zhǔn)確性。

樂準(zhǔn)生物自主研發(fā)的芯片式全血化學(xué)發(fā)光多重檢測(cè)系統(tǒng)為臨床檢驗(yàn)提供了更理想的解決方案。該系統(tǒng)采用微流控技術(shù)將7個(gè)完整流程的化學(xué)發(fā)光反應(yīng)轉(zhuǎn)移至一張芯片內(nèi)，一份樣本可同時(shí)檢測(cè)6個(gè)項(xiàng)目和1個(gè)內(nèi)標(biāo)。支持全血檢測(cè)，在芯片內(nèi)部利用磁吸附和生物膜過(guò)濾技術(shù)將全血中的細(xì)胞與血漿分離，免去了離心操作，通過(guò)精準(zhǔn)的微流控加樣技術(shù)定量血漿進(jìn)行反應(yīng)。采取了微腔室超聲混勻技術(shù)，快速進(jìn)行充分混勻的同時(shí)能將反應(yīng)液升溫至37℃附近，極大縮減了免疫反應(yīng)時(shí)間。首創(chuàng)人工智能管控檢驗(yàn)過(guò)程，在儀器內(nèi)部每一個(gè)工位均有視覺分析系統(tǒng)對(duì)芯片內(nèi)的動(dòng)作進(jìn)行監(jiān)管，確保加樣、混勻、清洗等步驟100%可靠。運(yùn)用化學(xué)發(fā)光試劑凍干技術(shù)，使試劑均一性更好，穩(wěn)定性更高，具備常溫保存能力。本文以心肌3項(xiàng)（cTnI、MYO、CK-MB）聯(lián)合檢測(cè)試劑盒為研究項(xiàng)目，評(píng)估該檢測(cè)系統(tǒng)的檢測(cè)性能。

1.評(píng)價(jià)方法

1.1 標(biāo)本來(lái)源

選取88份肝素抗凝血漿標(biāo)本作為對(duì)比樣本，全血的抽取、血漿分離均按照標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行。

1.2 儀器與試劑

1.2.1評(píng)價(jià)用試劑和部分試樣為湖南樂準(zhǔn)生物科技有限公司生產(chǎn)：心血管多項(xiàng)聯(lián)合測(cè)定試劑盒（磁微?；瘜W(xué)發(fā)光法），批號(hào)為20230823；心肌標(biāo)志物復(fù)合質(zhì)控品，批號(hào)為20230316；心血管多項(xiàng)空白限樣品，批號(hào)為20230821；心血管多項(xiàng)線性樣品，批號(hào)為20230821；心血管多項(xiàng)精密度樣品，批號(hào)20230821。

檢測(cè)系統(tǒng)-全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀（ICBS-90i），湖南樂準(zhǔn)生物科技有限公司。

1.2.3參比試劑：肌紅蛋白測(cè)定試劑盒（化學(xué)發(fā)光法），批號(hào)：338192，肌酸激酶同工酶測(cè)定試劑盒（化學(xué)發(fā)光法），批號(hào)：338003 ，高敏肌鈣蛋白I測(cè)定試劑盒（化學(xué)發(fā)光法），批號(hào)： 338467 ,Beckman Coulter公司。參比檢測(cè)系統(tǒng)為貝克曼全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀-UniCel DxI800。  

1.3 方法

1.3.1 空白限：依據(jù)《體外診斷試劑分析性能評(píng)估系列指導(dǎo)原則（征求意見稿）》和《心肌肌鈣蛋白-I定量測(cè)定試劑(盒)(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)》驗(yàn)證空白限。用零濃度校準(zhǔn)品作為樣本進(jìn)行檢測(cè)，重復(fù)測(cè)定20次，得出20次測(cè)量結(jié)果的RLU值（相對(duì)發(fā)光值），計(jì)算其平均值（`X）和標(biāo)準(zhǔn)差（SD），得出（`X ）+2SD，根據(jù)零濃度校準(zhǔn)品和相鄰校準(zhǔn)品之間的濃度-化學(xué)發(fā)光（RLU）值結(jié)果進(jìn)行兩點(diǎn)回歸擬合得出一次方程，將（`X ）+2SD所對(duì)應(yīng)的RLU值帶入上述方程中，求出對(duì)應(yīng)的濃度值，即為空白限?？瞻紫迲?yīng)小于規(guī)定要求，見下表1.。

1.3.2 線性范圍：依據(jù)《WST 408-2012 臨床化學(xué)設(shè)備線性評(píng)價(jià)指南》、《心肌肌鈣蛋白-I定量測(cè)定試劑(盒)(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)》驗(yàn)證線性。將接近線性區(qū)間上限的高值樣本和接近線性區(qū)間下限的低值樣本按一定比例稀釋為至少5種濃度，本次實(shí)驗(yàn)分別根據(jù)各個(gè)項(xiàng)目的線性范圍準(zhǔn)備6種不同濃度樣本，按試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行操作，對(duì)每一濃度的樣本均重復(fù)檢測(cè)3次，計(jì)算其平均值。將結(jié)果平均值和理論濃度用最小二乘法進(jìn)行直線擬合，并計(jì)算線性相關(guān)系數(shù)r。相關(guān)系數(shù)應(yīng)≥0.9900。

1.3.3 精密度實(shí)驗(yàn)方法：依據(jù)《WS_T 492-2016 臨床檢驗(yàn)定量測(cè)定項(xiàng)目精密度與正確度性能驗(yàn)證》驗(yàn)證精密度。樂準(zhǔn)生物提供的精密度樣品，包含高、低值2個(gè)濃度水平，每個(gè)樣品重復(fù)測(cè)定3次，連續(xù)測(cè)定5天，如果因?yàn)橘|(zhì)量控制程序或者操作問題判斷一批為失控，應(yīng)剔除數(shù)據(jù)，并增加執(zhí)行一個(gè)分析批。計(jì)算實(shí)驗(yàn)室內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)差和實(shí)驗(yàn)室變異系數(shù)，變異系數(shù)應(yīng)小于10%。

1.3.4比對(duì)實(shí)驗(yàn)：依據(jù)EP09-A2和《心肌肌鈣蛋白-I定量測(cè)定試劑(盒)(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)》進(jìn)行樣本比對(duì)評(píng)價(jià)，使用88份血漿標(biāo)本，比對(duì)試劑與參比試劑采用盲法操作，操作步驟及方法嚴(yán)格按照各自的產(chǎn)品說(shuō)明書要求進(jìn)行。對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行線性回歸統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)算相關(guān)系數(shù)r，判斷檢測(cè)結(jié)果是否線性相關(guān)。相關(guān)系數(shù)應(yīng)≥0.975。；

 1.3.5 檢測(cè)耗時(shí)分析：將檢測(cè)樣品試管和檢測(cè)試劑芯片放入設(shè)備后啟動(dòng)檢測(cè)的同時(shí)計(jì)時(shí)，到3個(gè)檢測(cè)項(xiàng)結(jié)果輸出后停止計(jì)時(shí)，記錄的時(shí)間即為檢測(cè)耗時(shí)。

2.結(jié)果分析

2.1空白限

空白限樣品（即零濃度度校準(zhǔn)液）重復(fù)測(cè)定20次，實(shí)驗(yàn)結(jié)果：MYO空白限為0.478ng/mL；CK-MB空白限為0.049ng/mL；cTnI空白限為0.008ng/mL；見表1。

表1.空白限

2.2線性范圍 

MYO在濃度為5.0 ng/mL～1000.0 ng/mL范圍內(nèi)，產(chǎn)品線性關(guān)系良好，回歸方程分別為y = 0.9948x + 2.0818，r = 0.9999, 見圖1；

CK-MB在 濃 度 為0.20 ng/mL～600.00 ng/mL范圍內(nèi)，產(chǎn)品線性關(guān)系良好，回歸方程分別為y = 0.996x + 0.6942，r = 0.9998，見圖2；

cTnI在 濃 度 為0.05 ng/mL～100.00 ng/mL范圍內(nèi)，產(chǎn)品線性關(guān)系良好，回歸方程分別為y = 1.0062x - 0.147，r = 0.9999，見圖3。

圖1.MYO線性相關(guān)圖

圖2.CK-MB線性相關(guān)圖

圖3. cTnI線性相關(guān)圖

2.3精密度

用樂準(zhǔn)生物提供的項(xiàng)目精密度樣品重復(fù)測(cè)定3次，連續(xù)測(cè)定5天。實(shí)驗(yàn)結(jié)果：MYO的2個(gè)不同濃度水平的精密度樣品的實(shí)驗(yàn)室變異系數(shù)均小于10%，CK-MB的2個(gè)不同濃度水平的精密度樣品的實(shí)驗(yàn)室變異系數(shù)均小于10%，cTnI的2個(gè)不同濃度水平的精密度樣品的實(shí)驗(yàn)室變異系數(shù)均小于10%，見表2。

表2.精密度分析

2.4比對(duì)實(shí)驗(yàn)

用參比試劑（貝克曼）和比對(duì)試劑（樂準(zhǔn)）共同對(duì) 88份血漿樣本分別檢測(cè)，MYO、CK-MB、cTnI樣本測(cè)值分布在檢測(cè)范圍內(nèi)，用 SPSS 軟件統(tǒng)計(jì)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果：

MYO計(jì)算得到線性回歸方程：y = 1.2577x - 6.6196，相關(guān)系數(shù)r=0.9900＞0.975，兩種試劑檢測(cè)結(jié)果線性相關(guān)，見圖4；

CK-MB計(jì)算得到線性回歸方程：y = 1.0187x - 1.5277，相關(guān)系數(shù)r=0.9902＞0.975，兩種試劑檢測(cè)結(jié)果線性相關(guān)，見圖5；

cTnI計(jì)算得到線性回歸方程：y = 0.8945x - 0.0186，相關(guān)系數(shù)r=0.9882＞0.975，兩種試劑檢測(cè)結(jié)果線性相關(guān)，見圖6。

圖4. MYO樂準(zhǔn)血漿與貝克曼血漿比對(duì)線性相關(guān)圖

圖5.CK-MB樂準(zhǔn)血漿與貝克曼血漿比對(duì)線性相關(guān)圖

圖6. cTnI樂準(zhǔn)血漿與貝克曼血漿比對(duì)線性相關(guān)圖

2.5 檢測(cè)耗時(shí)

完成第一片芯片檢測(cè)，輸出3個(gè)項(xiàng)目結(jié)果耗時(shí)12.5min；此后每間隔5min輸出后續(xù)芯片的3個(gè)項(xiàng)目結(jié)果。

3. 結(jié)論

本文充分探究了樂準(zhǔn)生物自研的芯片式全血化學(xué)發(fā)光多重檢測(cè)系統(tǒng)的性能情況，結(jié)果表明該系統(tǒng)可在15分鐘完成心梗三項(xiàng)的全血檢測(cè)，三個(gè)項(xiàng)目的空白限和線性范圍符合要求，精密度良好（CV小于10%），通過(guò)與主流進(jìn)口品牌比對(duì)，發(fā)現(xiàn)樂準(zhǔn)生物心梗三項(xiàng)結(jié)果與貝克曼品牌儀器的檢測(cè)結(jié)果相關(guān)性極強(qiáng)（r2＞97%），儀器自動(dòng)化程度好，僅需將樣本與耗材放入指定位置，儀器即可自動(dòng)完成檢測(cè)。儀器體積小巧，寬度僅29.7厘米，適用于門診，急診檢驗(yàn)和臨床科室，綜上所述，樂準(zhǔn)生物芯片式全血化學(xué)發(fā)光多重檢測(cè)系統(tǒng)兼顧了大型檢驗(yàn)設(shè)備的準(zhǔn)和小型床旁設(shè)備的快，是目前更加理想的臨床檢驗(yàn)解決方案。